Slot blot protokoll rna h1>

Northern blot Et nytt produkt med diazotisert cellulose (diazobenzyloxymethyl [DBM] -cellulose) RNA . o-aminophenylthioether-cellulose Hybridisering nitrocellulose RNA sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit sensit m m 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00…………………………….. RNA (9 kb) RNA-fragmentering . RNA er et nitrocellose-system, og det er ikke bare et problem som er et resultat av det samme som et helt annet. . Nylon membran er et godt valg. Nylon membran.

Nylonmembran Hybridisering av hybridiseringssignal . Seksjon nylon med bakgrunns hybridisering og nitrocellulose .

RNA, RNA, Nikkelcellulose, Nylonmembrane, RNA, RNA, Sample probe hybridisering, Skjonnhet

A. Formaldehyd-agarosegel RNA .

Lehrach (1977) av Goldberg (1980). formaledehyde formal formal formal formal formal formal formal formal formal.

10x Formaldehyd-gel-kjorer (10x MOPS): 41,2 g 3- (N-morfolin) propansulfonsyre (MOPS) Ror 800 ml autoklaver C 50 mM natriumacetat 10 ml 0,5 M EDTA, pH 8,0 . 0,5 m EDTA, pH 8,0, men det er ikke sa mye som mulig, men det er ikke sa mye som mulig. (0 M) Det er ikke sa mye som mulig. 10 N NaOH pH 7,0 1 liter . Autoclave Autoclave Autoclave Autoclave Autoclave er et 0,2 m filter for a oppna en autoflave med en autoflave. .

DEPC: Retningslinjer for salg av Romsignaler for RNA-produkter og RNA-produkter til DEPC-tjenester. Retningslinjer for godkjenning av varer og tjenester. DEPC er ansvarlig for a opprettholde og opprettholde en oversikt over opphavsretten. DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DE DEPC . DEPC . Gjenkjennelse av de trekkene som gjelder for DEPC, er det en avtale med Tris, som utvider seg fra DEPC til DEPC. Det er en avtale fra DEPC. RNA er en av de mest etterspurte tiltakene i RNA, og er en av de mest etterspurte tilfellene i 1994, og ble utgitt i 1994 for a utarbeide «grunnleggende metoder i molekyl rbiologi». Davis et al., 2. ed., Prentice-Hall International Inc., London, 1994, s. 321). Dette er en av de mest kjente valgene i USA, USA, USA, USA, USA, USA, USA, USA og USA.

Formaldehyd gel-lasting Terlon (50% glycerol, 0,1% brompenolbla)

1. 1x Formaldehyd Gel-kjorer .

2. Etterfolgende agarose gel . formaldehyde 1% agarose gel 70 ml . agarose 0,7 g 250 ml flaske 58 ml .

* Gyldig% Gyldig% Gyldig Gyldig Gyldig Gyldig Gyldig Gratulerer Gratulerer med Gratulerer med Agarose og 58 ml Gratorkede Gratulerer med Gratulerer med Gratulerer med Gratulerer med Gratulerer med Gratulerer med Gratulerer med Glemt passord? . 0,5 0,5 kg (0,5 ml) Ikke oppgitt.

agarose 60 � C vannbad . Spill na 10x kjorer Jack 7 ml 11,9 ml formaldehyd . Du kan ogsa fa tilsendt et budsjett. gel . 20 gel .

* Formel formaldehyd pa 13,2 M. hood gel .

3. Trekk pa en gang til neste gang, og klikk pa .

RNA (20 g ) 6 l.

10 x kjorer 2,5 l.

Formaldehyd 4 l.

Formamid 12,5 l.

4. Avspillingstid 65 C 5 . Laste pa gel-loading 2,5 l . .

5. Forhandsvisning av lyd 1 MOPS-skjermbilde for a opprette en forhandsvisning av en 50-dagers versjon av 5-arig.

6. Telefonsamtale 1x kjorer 120 V / cm 1.

2 kammerkammer . Bromophenol blue gel 2/3 forrige ………….

B. Northern blot-hybridisering.

RNA har en nylonmembran (Hybond TM -N; Amersham, UK). Glyoxal RNA nylon membran transfer formaldehyd gel overforing formaldehyd . Etikett med 1% pa lager med 0,5 cm i diameter, RNA-storrelse pa 2,5 kb, tilsvarende 0,05 N NaOH, 10% rabatt. RNA overforing . Gel 0,1 0,1 M Tris-Cl, pH 7,5 fra 30 til 5 timer, 20x SSC-termer (3 M NaCl, 0,3 M natrium-citrat, pH 7,3). Pa foresporsel er det 30 Transfer til . RNA overforer DNA-koden til DNA-skjermen. Membran RNA posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit posit Sjekker for a fa en oversikt over sone og sonde pa sonden. Pa bakgrunn av bakgrunnen er det mulig a opprette et bilde av en person som soker etter et bilde.

1. 20x SSC-godkjenningsprosjekt 2-arig 2-arig 20-arig SSC-godkjent 3-arig Whatman 3MM Dette er en oversikt over hva som er viktig for deg, og hva er det som skjer? agarose gel . Se ogsa pa denne siden.

2. Nitrocellulosemembran

3. Gjenkjenningsprosjektet er 500 g. Det er ikke tillatt a legge til en 6 – 18-dagers spill.

4. Neste nitrocellulose membran gel gele fra 6x SSC 5 membran agarose .

5. En membran med UV-kryss-linker. RNA-membran er en hybrid-hybridisering. .

6. Probe hybridisering Southern blot hybridisering .

* Detaljert beskrivelse er ikke tilgjengelig. Det er ikke sa mye som helst. «Recombinant DNA» (Watson et al., 2. utg., Scientific American, Inc., New York, 1992, s.129). Det er viktig a fa en svamp pa grunn av at det er et resultat av en oppdagelse .

C. Dot slot blot hybridisering.

Dot hybridisering Nemlig narkotikamembranen Nemlig narkotikamolekylmolekyler Nemlig narkotikamisbruk Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika Narkotika . Varekataloger er ikke tilgjengelig, men er ikke tilgjengelig. Det er ikke nodvendig a legge inn en e-postadresse. Det er ikke mulig a fa tak i det som skjer pa grunn av dette.

1) Filtrering membran Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Filtrering Gratulerer med at du ikke har noen gratulerer med det du leter etter, og det er et godt valg. Det er et godt eksempel pa en blokk, en blokk, en blokk og en annen plattform. Platformen er en membran. Det er en membran membrane membrane .

2) RNA slot blot ………………………………………………………..

1. 0,45 m probe probe (0,2 m) nitrocellulose membran 20 20 slot blot 0,1 N NaOH .

2. Oppsummer nitrocellulose membran .

3. slot 10x SSC slot ……………………….

4. RNA-klokkeslett er 10 l, og det er 100% formamid 20 l, formaldehyd 7 l, 20x SSC 2 l 68 15 RNA 2 .

5. slot spilleautomat , membran .

6. Avspilling slot membran 10x SSC slot slot 5 membran .

7. membran .

8. Mork membran pa bakken 80 � C Innvendig 2-sidig UV-kryss-linker RNA-membran .

9. Vannmembran og hybridisering .

D. RNase Protection Assay.

RNase Protection Assay (RPA) mRNA Northern blot-hybridisering. mRNA RNA probe (riboprobe) RNA hybridisering single strand S1 nukleas kartlegging RNA probe ex ex ex ron ron jun jun jun jun jun jun jun jun RNA-probe sannsynligvis test mRNA pa et autoradiografisk signal. MRNA-mRNA er et mRNA-system.

1) Northern Blot analyse Sensitivitet Sensitivitet (10 ar), RNA og RNA.

2) Probe mal RNA intakt .

3) Probe mal RNA .

4) Transkripsjonsinitiering, avslutningssted .

5) Northern Blot-analyse .

* RPA kan ikke brukes til a opprettholde en RNA-sonde. Strip-EZ RNA � -settet , hybridisering Ambion RPA III-kit .

Strip-EZ RNA TM-kit RNA-probe .

1. T7-promotor cDNA plasmid cDNA linearized template DNA .

* Bakteriofag-RNA-polymerase 3 ‘utstaende termini-kretslopskonfigurasjon CDNA-skjult blunt 5’extension linearisert mal DNA .

2. tube .

Nukleasefritt vann opptil 20 l.

DNA-mal 0,5-1 g.

10 x transkripsjonsbuffer 2 l.

2 mM modifisert CTP 1 ul.

10 mM UTP 0-1 l.

Merket UTP-endelige 3 M.

T7 RNA polymerase + RNase inhibitor 2 l.

) 10 transkripsjonsbuffer ribonukleotidlosning vortex .

3. Avslutt klokka Neste 22 � C.

37 � C 1 inkubasjon .

4. (valgfritt) 1 l DNase I 37 37 � C 15 .

5. Hybridiseringslosning 0.5 M EDTA syre 1 l -20 � C .

5 10 6 cpm / ml radiomerket probe probe hybridisering .

Ambion RPA III-settet kaller hybridhybridisering.

1. Radiomerket probe RNA .

* Omregner 10 g totalt RNA 0,6 g poly poly (A +) RNA 2.

8 x 10 4 cpm 150.

600 pg s probe . Gjore en prove med en sonde og en sonde. Det er et problem med a skille med deg selv. Problemer med a prove a prove a prove deg, og prov RNA, velg og kontroller. 2 .

2. 5 M Ammoniumacetat 0.5 N , -20 � C eller -80 � C 15 .

3. 4 � C, 10.000 omdr./min. I 15-aringen.

4. Det er 70% etanol, og det er ikke et problem.

5. Sender 10 l hybridiseringsbuffer .

6. 94 � C i 4-arig inkubering .

* RNA forsoker denaturering RNA . Inkubasjon vortex , tube .

7. 42 � C i lopet av natten hybridisering . Hybridisering er et resultat av en probesensor, og det er ikke noe som helst.

Hybridiser probe og sample RNA RNase Rom.

1. RNase A / RNase T1-blanding forsoke RNase digestion III buffer 150 l .

* Etter 1: 100 er det ingen tvil om at det kommer til a skje.

2. 150 l RNase hybrid hybridisering . Gj r RNA 2-oret ror RNase RNase fordoyelse III buffer 150 l .

3. 37 � C 30 .

4. RNase inaktivering / utfelling III buffer kjorer 225 l .

5. -20 � C 15 .

6. 4 � C, 10000rpm 15 .

7, , 70% etanol

RNA er en av de storste og mest popul re.

1. Denaturerende polyakrylamidgel . 50-1000 nukleotider 5-6% gel .

2 4-10 l gel gel lastebuffer kraftig hvirvel .